突变型HBV前C-C基因疫苗的构建及真核细胞表达
张敏1
辛绍杰2
胡燕2
侯俊2
沈宏辉2
王志杰2
貌盼勇2
1.解放军军医进修学院,北京,1008532.解放军第三○二医院,北京,100039
摘要：目的 采用点突变技术对HBV前C-C基因中的蛋白酶切位点进行4处点突变,构建突变型HBV前C-C/ENH Ⅱ重组基因疫苗,转染HepG2细胞,研究其在真核细胞内的表达情况.方法 采用单引物二次PCR法对质粒VEC依次进行基因点突变,得到151+154(VE2)、151+154+164+167点突变(VE4)2种突变型疫苗,转染HepG2细胞,通过细胞免疫化学、酶联免疫分析、免疫印迹等方法 检测其在HepG2细胞内的表达情况及表达产物的分子量.结果 VEC、VE2、VE4转染HepG2细胞均胞浆表达目的 蛋白,产物分子量分别为18、20、22 kD,细胞裂解液的HBeAg含量VE4、VE2高于VEC,上清中则反之.结论 突变型HBV前C-C基因疫苗VE2、VE4构建成功并表达预期病毒前C蛋白前体.
关键词：乙型肝炎DNA疫苗点突变Pre-C抗原增强子Ⅱ
分类号：R5121.62(传染病)
资助基金：创新基金(2004001)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 294-297 )
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