含人APOBEC3F启动子荧光素酶报告基因载体的构建
赵柯
王临旭
庄严
黄德东
李媛
康文臻
孙永涛
1.第四军医大学唐都医院传染科,西安,7100382.第四军医大学唐都医院传染科,西安,7100383.第四军医大学唐都医院传染科,西安,7100384.第四军医大学唐都医院传染科,西安,7100385.第四军医大学唐都医院传染科,西安,7100386.第四军医大学唐都医院传染科,西安,7100387.第四军医大学唐都医院传染科,西安,710038
摘要：目的 构建含人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(apolipoprotein B mRNA editing enzyme,catalytic polypeptide-like 3F,APOBEC3F)基因启动子的萤光素酶报告基因载体.方法 应用5'cDNA末端快速扩增分析(5'rapid amplification of cDNA ends,5'RACE)技术确定APOBEC3F转录起始位点,利用PCR技术扩增人APOBEC3F启动子序列,构建含人APOBEC3F启动子的萤光素酶报告基因载体,行双酶切及测序鉴定,并通过双萤光素酶报告基因系统检测启动子活性.结果 APOBEC3F基因转录起始位点位于GenBank已公布的APOBEC3F cDNA起始位置上游13个核苷酸处,测序结果表明克隆获得的APOBEC3F基因启动子序列与GenBank报道一致.重组载体pGL3-A3F-Prom组F/R值(0.342 082±0.023 516)与空载体pGL3-basic组(0.007 871±0.002 357)相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 成功构建了含人APOBEC3F基因启动子的萤光素酶报告基因载体,为更深入研究APOBEC3F基因转录调控机制奠定了基础.
关键词：启动区遗传荧光素类基因病毒HIV-1反转录
分类号：R394-33(医学遗传学)R512.91(传染病)
资助基金：国家自然科学基金(30872347)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 333-336 )
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