HBV微环DNA重组质粒的构建及初步药效学实验
饶桂荣
张换敬
黄彬
陈光明
王洪敏
杨富强
1.解放军第四五八医院全军肝病中心, 广州,5106002.解放军第四五八医院全军肝病中心, 广州,5106003.解放军第四五八医院全军肝病中心, 广州,5106004.解放军第四五八医院全军肝病中心, 广州,5106005.解放军第四五八医院全军肝病中心, 广州,5106006.解放军第四五八医院全军肝病中心, 广州,510600
摘要：目的 构建HBV的治疗性微环质粒并进行体内外实验研究. 方法 采用聚合酶链式反应扩增HBV包膜蛋白preS2.S抗原基因和hIL-2-IFNγ融合基因,将2个基因分别克隆于ZY781载体,得到亲本质粒preS2.S/ZY781和hIL-2-IFNγ/ZY781,测序正确后,用阿拉伯糖诱导生成微环质粒pMCS2.S和pMCIIF. 转染微环质粒于COS-7细胞株,用酶联免疫吸附法定量法检测24、48、72 h时目的蛋白的表达情况.双质粒联合在体电脉冲注射BALB/c小鼠,4周后处死小鼠,检测特异性的体液和细胞免疫应答. 结果 微环质粒pMCS2.S和pMCIIF转染COS-7细胞后,目的蛋白HBsAg、白细胞介素-2、干扰素 γ在不同时间均有表达,在48 h达峰值,分别为(60.3±7.8)、(17.7±1.9)、(10.3±0.9) ng/ml. 微环质粒pMCS2.S能诱导小鼠产生HBsAb的抗体保护,佐剂pMCIIF可显著增强其免疫效果,在低剂量5μg/只就能诱导较强特异性细胞和体液免疫. 结论 成功构建了HBV微环质粒pMCS2.S及其佐剂微环质粒pMCIIF,其有较好的体内外活性.
关键词：疫苗DNA质粒乙型肝炎病毒治疗学
分类号：R186.4(流行病学与防疫)R394.33(医学遗传学)
资助基金：国家"十二五"科技重大专项(2014ZX10002002003)2014年广东省自然科学基金(408192444036)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 88-91,98 )
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