贝氏柯克斯体类脂A修饰突变株的转化与鉴定
王涛1
王权1
罗声栋2
张爱民1
李文刚1
段学章1
1.100039 北京,解放军总医院第五医学中心肿瘤医学部放射治疗科2.100039 北京,解放军总医院第五医学中心感染病医学部国家感染临床医学研究中心
摘要：目的 基于遗传克隆后的电转化技术,探索构建贝氏柯克斯体脂多糖修饰突变的实验室研究模型.方法 设计并分子克隆引入衣原体KDO基因构建穿梭质粒,电转化贝氏柯克斯体后以半固体无生命培养克隆纯化并扩大培养,进一步用相差显微镜观察抑制剂LPC-011对贝氏柯克斯体的影响,利用qPCR定量对比测定转化突变与野生株在细胞或无细胞条件下的生长曲线并在Vero细胞中测得感染性集落形成单位.结果 载体pCBGkdtA可稳定转化贝氏柯克斯体,LPC-011 对贝氏柯克斯体最小抑菌浓度可能大于 10 μg/mL,类脂A修饰后的贝氏柯克斯体生长繁殖特性较野生型无显著改变.结论 成功构建了贝氏柯克斯体类脂A修饰株CBkdtA并对其生长繁殖与感染特性进行了鉴定,本研究为进一步在动物模型中探究脂多糖的致病机理提供了新方法.
关键词：贝氏柯克斯体脂多糖类脂A电转化遗传
分类号：R376(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
论文发表日期：2024-10-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 455-458,475 )
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