红色荧光-VEGF165融合蛋白载体在细胞内的定位和表达
邹海波1
安洪1
蒋电明1
刘建伟1
周亚莉2
1.重庆医科大学附属第一医院骨科,重庆,4000162.重庆医科大学医学检验系,重庆,400016
摘要：目的构建在哺乳动物细胞中表达人VEGF165(hVEGF165)红色荧光蛋白(RFP)的融合表达载体.方法根据已知的人VEGF165序列,用PCR方法,从质粒pUC18/VEGF165中扩增出去除终止密码子的VEGF165片段,定向克隆至pDsRed1-N1质粒中.重组质粒经限制性内切酶和DNA序列测定鉴定.以DOTAP为介导,将pDsVEGF165Red1-N1转染293-T细胞,48小时后用RT-PCR、激光共聚焦显微镜检测VEGF165在细胞内表达和分布情况.结果重组的融合蛋白表达载体经酶切、PCR和DNA序列测定证明构建正确,并在293-T细胞中表达.报告基因-红色荧光蛋白在细胞质、细胞核中都有一定的分布.结论成功构建了pDsVEGF165Red1-N1红色荧光蛋白融合表达载体,该载体能在哺乳动物细胞中表达,为研究VEGF的细胞内定位提供了一个重要而方便的工具.
关键词：血管内皮细胞生长因子红色荧光蛋白真核细胞基因表达
分类号：Q343.1(遗传学分支学科)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 209-212 )
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