人骨髓间充质干细胞体外分离培养、鉴定及标记
李海红1
付小兵2
周岗2
白晓东2
陈伟2
朱国俊2
蔡存良2
孙同柱2
1.解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室,北京,100037;郧阳医学院附属太和医院,湖北,十堰,4420002.解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室,北京,100037
摘要：目的探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)体外分离培养、鉴定和标记的方法以及生物学特性.方法无菌条件下穿刺人髂后上嵴抽取骨髓,采用直接贴壁法分离纯化hMSCs,体外扩增,用免疫细胞化学法及流式细胞仪分别对培养的hMSCs进行鉴定,同时检测第3代和同代溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)标记的hMSCs细胞周期.结果体外培养的原代hMSCs在培养24小时内可见少量贴壁细胞,7天达到融合,免疫细胞化学示CD44和CD105表达阳性,CD34表达阴性,流式细胞仪示CD44阳性率为89.64%,CD34为0.11%.大部分hMSCs核抗BrdU染色阳性,阳性率达90%.细胞周期显示第3代和同代BrdU标记的hMSCs约有90%的细胞处于G0/G1期,第10代为80%.结论 hMSCs在体外很容易分离培养和扩增,但随着传代次数的增加,hMSCs变得宽大扁平且增殖速度减慢,出现衰老现象;用BrdU标记hMSCs对其细胞周期无明显影响,可作为标记细胞的一种有效手段.
关键词：人骨髓间充质干细胞分离培养鉴定标记细胞周期
分类号：R331.2(人体生理学)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(G1999054204)国家自然科学基金(30170966,30230370)国家自然科学基金(39525024)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 291-293 )
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