高迁移率族蛋白B1cDNA的克隆与表达
陈婧
袁志强
彭毅志
1.第三军医大学西南医院烧伤研究所,重庆,4000382.第三军医大学西南医院烧伤研究所,重庆,4000383.第三军医大学西南医院烧伤研究所,重庆,400038
摘要：目的 克隆人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)cDNA,构建重组原核表达载体,对其诱导表达并鉴定,为设计HMGB1 cDNA突变体及诱导表达可竞争性抑制HMGB1炎症效应的突变体蛋白奠定基础.方法 提取人新鲜扁桃体组织总RNA,经RT-PCR扩增出人HMGB1 cDNA序列,并克隆至载体pUC18进行序列测定,随后构建于原核表达载体pQE-80L中,经IPTG诱导4小时后,可表达Mr约30 000的蛋白.Western Blotting鉴定所表达的目的蛋白.结果 经RT-PCR扩增得到了648 bp的cDNA,经序列分析与GenBank中报道的已知序列完全一致,构建了HMGB1蛋白的重组表达质粒,诱导表达了目的蛋白,经Western Blotting证实,在Mr约为30000处有一条清楚的蛋白带.结论 获得了HMGB1 cDNA的克隆与原核表达载体.
关键词：高迁移率族蛋白克隆表达
分类号：R392.2(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30400469)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 32-35 )
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