GFAP重组蛋白表达纯化及其主动免疫对脊髓损伤的神经保护作用
曹鹏
李志清
高旭
陈君
张海峰
梁国标
1.110015辽宁,沈阳,沈阳军区总医院神经外科2.110015辽宁,沈阳,沈阳军区总医院神经外科3.110015辽宁,沈阳,沈阳军区总医院神经外科4.110015辽宁,沈阳,沈阳军区总医院神经外科5.110015辽宁,沈阳,沈阳军区总医院神经外科6.110015辽宁,沈阳,沈阳军区总医院神经外科
摘要：目的 构建表达胶质原纤维酸性蛋白(glial fibillary acidic protein,GFAP)的质粒,诱导表达GFAP蛋白,纯化鉴定后主动免疫大鼠,并通过SCI大鼠行为学研究GFAP蛋白主动免疫在脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)中的神经保护作用,为开展下一步研究工作做准备.方法 从人脑胶质瘤组织提取mRNA,采用RT-PCR的方法克隆GFAP序列并表达后,将GFAP基因片段与原核表达质粒pGEX-4T-2连接,转化宿主菌BL21构建重组质粒,诱导表达后纯化,主动免疫大鼠,通过建立SCI大鼠模型,观察行为学评分,验证蛋白免疫效果.结果 从脑胶质瘤组织克隆出1300bp的GFAP目的 片段,成功构建GFAP表达质粒,制备并纯化GFAP重组蛋白后成功免疫大鼠,并通过SCI大鼠行为学评分验证其神经保护作用.结论 成功构建重组质粒pGEM-T/GFAP,表达纯化GFAP重组蛋白,并验证了GFAP蛋白主动免疫对脊髓损伤的神经保护作用.
关键词：脊髓损伤胶质原纤维酸性蛋白质粒构建免疫神经保护
分类号：R651.2(外科学各论)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 244-249 )
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