小鼠脊髓损伤组织高表达的microRNA-21对neuro-2a细胞PDCD4的影响
佘飞
苏琴
张宪
孙本强
贾晓颖
赵晓东
张华
摘要：目的 验证小鼠损伤脊髓中高表达的microRNA-21(miR-21)在neuro-2a细胞中对程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的作用,初步探讨miR-21在脊髓损伤过程中的作用.方法 将neuro-2a细胞在体外培养16h,分别按相应体系转染miR-21 mimics,继续培养48h,提取6孔板内细胞总蛋白和总RNA行蛋白印记和实时定量PCR检测,利用HEK293细胞行荧光素酶报告基因检测.结果 neuro-2a细胞转染miR-21 mimics后,其内源性程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达在蛋白和mRNA水平均明显降低.双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-21对PDCD4 3'非翻译区(3'-UTR)的预测位点有直接抑制作用,而将此位点突变后,miR-21对PDCD4 3'-UTR预测位点的抑制作用消失.结论 miR-21通过直接作用于PDCD4 3'-UTR靶位点从而在mRNA和蛋白水平抑制PDCD4的表达.miR-21可能在脊髓损伤过程中具有重要的保护作用.
关键词：脊髓损伤神经细胞蛋白小鼠
分类号：R651.2(外科学各论)
论文发表日期：2015-01-01
页数：4( 546-549 )
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