长链非编码RNA np-5318对大鼠肠道缺血再灌注损伤作用研究
陈镜宇
王鑫宇
张成
北部战区总医院 普通外科,辽宁 沈阳 110016
摘要：目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)np-5318 在肠道缺血/再灌注(I/R)损伤中的表达及作用,并分析np-5318 与表皮生长因子受体(EGFR)信号通路的相互作用.方法 选取 20 只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=10)与I/R组(n=10).I/R组麻醉后沿腹部中线做 1.0～1.5 cm切口,显露肠系膜上动脉(SMA),使用微动脉夹夹住SMA以阻断血流,45 min后经原切口入腹,取出动脉夹,恢复血供,构建大鼠肠道I/R损伤模型.假手术组仅分离SMA,但不夹闭SMA.I/R组再灌注后 6 h处死大鼠,同时,处死假手术组大鼠,并立即取出肠道组织.计算假手术组与I/R组肠道干湿比(W/D).采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测np-5318 在假手术组与I/R组肠道组织中的表达.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肠道转化生长因子-β(TGF-β)、γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素 4(IL-4)、白细胞介素 6(IL-6)、白细胞介素 17A(IL-17A)和环氧化酶-2(Cox-2)水平.取大鼠肠道上皮细胞分为对照组、I/R模型组与转染si-np-5318 组.转染si-np-5318 组与I/R模型组的大鼠肠道上皮细胞构建体外I/R模型,并分别转染si-np-5318 抑制lncRNA np-5318 表达和相应的对照(si-NC).采用MTT比色法检测细胞活性,并通过qRT-PCR检测np-5318 以及EGFR通路相关基因的表达量.结果 I/R组肠道组织W/D及炎症因子TGF-β、INF-γ、IL-4、IL-6、IL-17A、Cox-2 表达水平均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05).qRT-PCR结果显示,I/R组np-5318 表达水平为(2.07±0.14),高于假手术组的(1.02±0.11),差异有统计学意义(P<0.05).MTT比色测定结果显示,I/R模型组细胞活性低于对照组,而转染si-np-5318 组细胞活性高于I/R模型组,差异有统计学意义(P<0.05).对照组与转染si-np-5318 组细胞活性比较,差异无统计学意义(P>0.05).I/R模型组EGFR信号通路基因HBEGF、CSK、HGS表达量较对照组显著下降,而转染si-np-5318 组EGFR信号通路基因HBEGF、CSK、HGS表达量较I/R模型组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在肠道I/R中,lncRNA np-5318 可抑制EGFR信号通路,可能是lncRNA np-5318 加重肠道I/R损伤的潜在机制.
关键词：肠道缺血再灌注损伤长链非编码RNA np-5318表皮生长因子受体信号通路
分类号：R574(消化系及腹部疾病)
论文发表日期：2023-10-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 313-316,322 )
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