尿嘧啶DNA糖苷酶防止PCR产物污染及其对核酸杂交的影响
王省良1
周东耀2
王丽之2
万成松1
曾位森1
彭华国1
王虹1
1.第一军医大学,生物医学诊断研究心,广东,广州,5105152.第一军医大学,珠江医院检验科,广东,广州,510282
摘要：目的采用PCR微板核酸杂交ELISA技术分析尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG/UDG)防止PCR产物污染及其对PCR扩增效率的影响,探讨在不同A/T含量的微生物中含尿嘧啶的PCR产物对核酸杂交的影响.方法以3组dUTP含量不同的PCR产物作模板,抗污染组用UNG处理,直接进行再次扩增.用微板核酸杂交ELISA检测第二次PCR扩增的结果. 结果抗污染组中以含dUTP的PCR产物作模板,结果为阴性;而以不含dUTP的PCR产物作模板,结果为阳性.非抗污染组全部为阳性.对3组PCR产物再进行核酸杂交无明显差别,且在一定温度内,3组具有同样的稳定性. 结论 UNG能有效降解含dUTP的PCR产物,使之不能作为模板再次扩增,可以有效地防止PCR产物的污染.含有尿嘧啶的PCR产物对寡核苷酸探针的杂交无影响.
关键词：尿嘧啶脱氧核糖核酸酶类糖苷水解酶类聚合酶链反应抗污染核酸杂交
分类号：R342.5(基础医学)R349.1(基础医学)R914.4(药物基础科学)
论文发表日期：2000-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 319-321 )
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