人源性大肠癌自然致敏噬菌体抗体Fab呈现库的构建与筛选
吴保平1
张亚历1
肖冰1
张振书1
赖卓胜1
王亚东1
高春芳2
周殿元1
1.第一军医大学南方医院全军消化病研究所,2.第150医院全军肛肠外科中心,
摘要：目的构建大肠癌病人自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库,初步筛选相关抗大肠癌抗体。方法取大肠癌病人转移淋巴结,提取淋巴结总RNA,逆转录PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物插入载体pComb3的相应部位,构建人源性大肠癌噬菌体Fab基因库,并应用噬菌体表面呈现技术对该抗体库进行淘选及鉴定。结果所选2种Ig亚类的重链Fd片段、2种κ轻链cDNA得到扩增。Fd片段和κ轻链均插入pComb3的重组率为40%,Fab噬菌体表达库容达1.48×106。经3轮淘选,抗体库得到约120倍的富集。3轮抗体库的点印记免疫染色均显示有Fab表达;酶联免疫吸附实验显示其与大肠癌抗原有结合活性。结论成功构建了大肠癌病人自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库,利用噬菌体抗体库技术,可筛选相关抗大肠癌抗体。
关键词：大肠癌噬菌体表面呈现抗体库
分类号：R735(消化系肿瘤)R392(医学免疫学)
资助基金：青年骨干教师基金(96Z026)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 270-274 )
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