带信号肽人血管内皮生长因子基因 VEGF121及VEGF165载体的克隆
周忠江1
刘伊丽1
吴平生1
李小卫1
查道刚1
周颖2
1.第一军医大学南方医院心内科,广东广州510512.浙江大学医学院心内科,浙江杭州310000
摘要：目的克隆及构建带信号肽人血管内皮生长因子基因VEGF121及VEGF165表达载体.方法对正常引产胎儿肺组织的总RNA进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),克隆入T载体,测定扩增片段序列,进而克隆入表达质粒pcDNA3 1-,酶切鉴定重组子.结果用一对引物(5'引物为-21～7 bp,3'引物为554～576 bp)可扩增出两个条带,短条带为VEGF121(487 bp),长条带经筛选可得到两个片段,一为正常的VEGF165(619 bp),另一个为新的VEGF mRNA"异常"剪切片段测序结果显示,此"异常"剪切片段扩增长度为639 bp,同样为VEGF165全长核苷酸序列,但在VEGF165的第3和第4外显子之间插入了长度为20 bp的片段.经序列检索发现20 bp的插入序列为滞留的第3内含子终末序列,含内含子剪切信号.结论克隆出带信号肽人血管内皮生长因子基因VEGF121及VEGF165表达载体,同时在正常引产胎儿的肺组织中可能发现了一种新的VEGFmRNA可变剪切形式.
关键词：血管内皮生长因子剪切逆转录-聚合酶链反应外显子内含子克隆分子
分类号：R349.21(基础医学)R394.3(医学遗传学)
资助基金：军队医学科研项目(01Z052)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 111-113 )
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