重组人骨形态发生蛋白-2在大肠杆菌中的表达及纯化
熊绍虎
余磊
谭海燕
黄涛
王朝阳
刘大庸
钟世镇
1.第一军医大学临床解剖学研究所,广东,广州,5105152.第一军医大学临床解剖学研究所,广东,广州,5105153.第一军医大学临床解剖学研究所,广东,广州,5105154.第一军医大学临床解剖学研究所,广东,广州,5105155.第一军医大学临床解剖学研究所,广东,广州,5105156.第一军医大学临床解剖学研究所,广东,广州,5105157.第一军医大学临床解剖学研究所,广东,广州,510515
摘要：目的用基因工程技术在大肠杆菌中表达人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2).方法 hBMP-2原核表达载体pYR(pBV220-hBMP-2)转化Ecoli BL21,SDS-PAGE分析工程菌活化状态以及诱导时间与目的蛋白表达率的关系.离子交换层析DEAE和分子筛S-300纯化重组蛋白,自然缓降复性法对其复性.结果 SDS-PAGE显示在相对分子质量约为13 000时出现明显外源蛋白表达带,而且当工程菌30℃活化至D600约为0.45时,其表达效率较高;在此状态下,温度诱导表达4 h,目的蛋白表达量最高,以后随着时间的延长,表达量稍下降.重组蛋白经纯化后植入小鼠肌肉,组织学观察到肌肉内大量间充质细胞增生以及软骨与骨形成.结论重组hBMP-2具有良好异位成骨活性.
关键词：骨形态发生蛋白-2大肠杆菌基因工程
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：广东省医药卫生科研项目(99B06703G)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 413-416 )
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