副溶血性弧茵耐热直接相关溶血素基因的克隆与序列分析
苏建新
聂军
吴振龙
1.第一军医大学流行病学教研室,广东广州,5105152.第一军医大学流行病学教研室,广东广州,5105153.第一军医大学流行病学教研室,广东广州,510515
摘要：目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法.方法用PCR技术扩增目的基因双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5α.对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析.结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600 bp.阳性克隆的PCR产物也为一长约600 bp的条带,经双酶切可切出一约600bp的条带.DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99.1%的同源性.结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp的致病机制研究奠定了基础.
关键词：弧菌副溶血性耐热直接相关溶血素大肠杆菌克隆分子序列分析
分类号：R349.32(基础医学)R394.2(医学遗传学)R378.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：广东省医药卫生科研项目(A2000347)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 515-517 )
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