pGFP-FL质粒的构建及其在FL基因修饰性肿瘤疫苗中的应用
卢洋1
薛琪2
钱卫珠1
王皓1
吴孟超1
郭亚军1
1.第二军医大学肿瘤研究所,东方肝胆外科医院,上海2004332.第一军医大学南方医院普外科,广东广州510515
摘要：目的构建一个含有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因,并能够用于Ⅲ型酪氨酸激酶受体Flt3的配体(FL)基因修饰性肿瘤疫苗研究的质粒载体.方法利用常规分子生物学方法设计并构建含有一个FL基因和一个GFP基因的pGFP-FL质粒.在该质粒中,以CMV启动子驱动FL基因,同时以肽链延长因子(EF-1α)启动子驱动GFP基因,并引入原核和真核选择基因KanR/neo.对所获得的pGFP-FL质粒以限制性内切酶酶切鉴定后,再将其导入Hepal-6细胞内,直接在荧光显微镜下观察GFP基因的表达情况,同时以RT-PCR和PCR产物测序的方法对GFP阳性细胞内FL基因的表达进行检测.结果质粒的酶切鉴定结果表明所构建的pGFP-FL与预期的结构一致,FL和GFP两者能同时在Hepal-6细胞内表达.结论本研究构建了一种新型的FL基因修饰肿瘤疫苗研究载体,位于该载体上的GFP的表达能够反映FL基因的转录表达情况,可以作为FL基因表达的报告基因.
关键词：疫苗基因表达免疫学技术基因肿瘤质粒
分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30025039)上海市科技发展项目(99JCl4038)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 592-595 )
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