弓形虫ROP2基因的体外扩增及真核表达重组质粒的构建
吴昆
陈晓光
李华
支国舟
1.第一军医大学寄生虫学教研室,广东,广州,5105152.第一军医大学寄生虫学教研室,广东,广州,5105153.第一军医大学寄生虫学教研室,广东,广州,5105154.第一军医大学寄生虫学教研室,广东,广州,510515
摘要：目的构建弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)基因真核表达重组质粒.方法根据ROP2基因已知序列,设计合成一对引物,上、下游引物分别引入EcoRⅠ、SdⅠ酶切位点,用PCR方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码ROP2的基因片段,插入pGEX-4T-l质粒,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ROP2,而后经EcoRⅠ、Not Ⅰ双酶切出ROP2基因片段,再亚克隆到载体pcDNA3中构建真核表达重组质粒pcDNA3-ROP2.结果ROP2基因体外扩增产物大小约1 043bp,重组质粒经酶切及PCR鉴定表明获得正确重组子,克隆基因测序结果与已知序列基本吻合.结论在国内首次克隆了弓形虫ROP2基因并构建了真核表达质粒pcDNA3-ROP2,为下一步弓形虫DNA疫苗研究打下了基础.
关键词：弓形体属棒状体蛋白2疫苗基因重组基因表达克隆
分类号：R394-33(医学遗传学)Q782(基因工程（遗传工程）)
资助基金：广东省科技厅科技计划(A1090205)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 620-623 )
英文信息