胞内精子注射法制备转基因爪蟾的研究
江培洲1
冯湘玲2
黄华1
沈新明1
史剑凌2
姚开泰1
1.第一军医大学肿瘤研究所,广东广州5105152.中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南,长沙,410078
摘要：目的研究爪蟾胞内精子注射法(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)转基因技术的可行性.方法取成熟雄蛙的睾丸分离纯化精子,用毛地黄皂甙(digitonin)崩解精细胞膜并制备精子浓缩液,然后与线性化报告基因载体pCMV-EGFP-N1共处理,最后将处理后的精子注射入从雌性爪蟾体内取出的未受精卵中,培养并观察.结果制备的精子质量较高,稀释的精子注射人未受精卵后,卵的受精率为10%,受精卵活过神经胚的比率为20%,但都略微有点畸形.其中,绿色荧光报告基因EGFP的整合率为81%,但镜下未见绿色荧光蛋白的表达.结论ICSI法是制备转基因爪蟾的简便可行的新途径.
关键词：爪蟾胞内精子注射法显微注射绿色荧光蛋白
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：美国中华医学会资助项目(96-655)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 673-677 )
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