日本血吸虫新基因——腺苷酸激酶基因的发现与克隆
彭鸿娟1
陈晓光1
卢晓昭2
龙綮新1
1.第一军医大学寄生虫学教研室,广东,广州,5105152.第一军医大学学员一旅五队,广东,广州,510515
摘要：目的将用表达序列标签(expression sequencetag,EST)策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因--腺苷酸激酶(adenylatekinase,AK)cDNA克隆到表达质粒pET32a(+)上,为下一步研究该基因的功能做准备.方法将插入于pTrip1Ex2质粒上的cDNA进行测序,用BLASTn程序搜索测序结果,根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物,将PCR产物纯化后连接到pMD 18-T载体上,将重组T载体经EcoRⅠ/Xho取酶切后切下的SjAK基因导人原核可溶性表达质粒pET32a(+)中.结果本研究所发现的新基因与曼氏血吸虫AK基因的同一性达86%,PCR产物的片段长度与预期大小一致,重组T载体及表达质粒经EcoRI及XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段.结论发现日本血吸虫的cDNA与曼氏血吸虫AK cDNA高度同源,并且成功地构建出重组表达质粒pET32a(+)-SjAK.
关键词：日本血吸虫曼氏血吸虫腺苷酸激酶
分类号：R382.24(医学寄生虫学)Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：联合国发展计划署资助项目(UNDP;A00690,A00191)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 693-696 )
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