编码霍乱肠毒素B亚单位基因植物表达载体的构建
彭志强1
俞守义1
余迪求2
贺竹梅2
1.第一军医大学流行病学教研室,广东,广州,5105152.中山大学生物工程研究中心,广东,广州,510275
摘要:目的构建含霍乱肠毒素B亚单位(CTB)基因的植物双元表达载体.方法采用高保真PCR方法调出CTB基因,定向克隆到中间载体pRTL2,经测序证实核酸序列正确后,再亚克隆到含植物双元表达载体pBI121上;采用电击法,将含CTB的植物表达载体转入根癌农杆菌中,并进行酶切证实.结果PCR扩增的CTB片断亚克隆到中间载体,得到pRCTB和pRCTBK,测序证实CTB核酸序列正确;再与根癌农杆菌双元载体pBI121连接,获得含CTB基因的植物双元表达载体pBI-CTB和pBI-CTBK,转入根癌农杆菌的载体,酶切证实正确.结论采用正确技术路线,构建了含CTB基因的植物表达载体,为下一步的转基因植物表达研究打下了坚实的基础.
关键词:霍乱肠毒素亚克隆多聚酶链式反应植物表达载体
分类号:R516.5(传染病)Q782(基因工程(遗传工程))
论文发表日期:2002-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 736-738 )
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