应用激光显微分离技术在骨肉瘤组织原位筛选噬菌体肽库
吕海1
郑燕芳2
金大地1
1.第一军医大学,南方医院脊柱骨科,广东广州,5105152.第一军医大学,珠江医院肿瘤科,广东,广州,510282
摘要：目的将激光显微分离(1aser capturemicrodissection,LCM)技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选过程,建立一种可以直接在天然组织中筛选肽库的方法.方法将新鲜人骨肉瘤组织块在噬菌体肽库溶液振荡孵育后制成组织冰冻切片,免疫组化染色检测噬菌体在组织中的浸润扩散.改进常规LCM切片处理方法,以冻干法替代酒精/二甲苯法脱水,以期在LCM操作过程中提高切片上噬菌体的存活率.LCM法分离摄取骨肉瘤切片上的肿瘤靶细胞,转染回收这些细胞上特异结合的噬菌体.滴定法检测所筛选的噬菌体对特异性细胞的亲和力.结果利用LCM技术,可以由肿瘤冰冻切片上收集到足够的与特异性噬菌体短肽,应用于噬菌体表面呈现肽库筛选.经过3轮筛选后所获得的噬菌体与人骨肉瘤组织的特异性亲和力提高16倍.结论本研究首次将LCM技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选,可以使我们直接在新鲜人肿瘤组织中筛选与特定细胞群甚至单个细胞亲合的短肽;同时又避免了天然组织中其他杂质细胞的污染,为研制细胞特异性导向载体提供了一个新的途径.
关键词：激光显微分离技术噬菌体表面呈现肽库体内生物淘筛骨肉瘤/人导向治疗
分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)R394.3(医学遗传学)R738.1(运动系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(39900150)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1079-1081,1086 )
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