番茄果实特异性E8启动子的基因克隆与序列分析
周晓红1
陈晓光1
张晓东2
王亚楠3
李林3
习佳飞3
胡建军3
1.第一军医大学寄生虫学教研室,广东,广州,5105152.北京市农林科学院生物技术研究中心,北京,1000843.第一军医大学学员一旅五队,广东,广州,510515
摘要：目的获取番茄果实特异性E8启动子基因,为实现外源基因在转基因番茄中果实特异性表达做准备.方法培养中蔬5号(ZhongshuNo.5)番茄幼苗,采集叶片,用Omega公司的植物基因组提取试剂盒提取番茄基因组DNA;设计引物,从基因组中通过PCR扩增获得番茄果实特异性E81.1和E82.2启动子基因;克隆进pGEM-T载体,酶切鉴定;送上海基康公司测序;序列分析.结果从番茄基因组DNA中PCR扩增得到预期大小的启动子片段;构建重组pGEM-T-E81.1和pGEM-T-E82.2载体,经酶切证实具有与目标片段长度相符的插入片段;测序结果分析显示:番茄果实特异性E8启动子序列高度保守,所获得的ZhongshuNo.5 E82.2启动子DNA序列与Deikman报道的Cherry种的E82.2启动子同源性为99%,登陆GenBank,ID号为AF515784.结论成功获得ZhongshNo.5番茄果实特异性E81.1、E82.2启动子基因,为下一步转基因番茄口服疫苗的研制奠定了一定的工作基础.
关键词：番茄果实特异性E8启动子基因克隆
分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)Q943.2(植物细胞遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(30080024)广东省自然科学基金(001052)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 25-28 )
英文信息