PCR-RSSO基础上HLA-Ⅰ、Ⅱ基因分型的研究
肖露露
郝桂琴
叶欣
陈洪涛
谭茵
张升
1.广州器官移植配型中心,广东,广州,5100952.广州器官移植配型中心,广东,广州,5100953.广州器官移植配型中心,广东,广州,5100954.广州器官移植配型中心,广东,广州,5100955.广州器官移植配型中心,广东,广州,5100956.广州器官移植配型中心,广东,广州,510095
摘要：目的通过对PCR-DNA技术的分析,探讨人类白细胞抗原(HLA)基因分型方法.方法采用PCR反向序列特异性寡核苷酸(polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide,PCR-RSSO)杂交技术,建立改良半量扩增体系全自动HLA-Ⅰ、Ⅱ等位基因分型方法,进行了635份血液标本HLA-A、B、C、DR、DQ等位基因分型,其中166份DNA同时采用序列特异性引物技术(PCR-SSP)和手工全量扩增体系PCR-RSSO技术.对全自动半量PCR-RSSO、PCR-SSP、手工PCR-RSSO 3种方法做两两比较.结果全自动半量PCR-RSSO的分型成功率为98.4%(3 124/3 175),PCR-SSP为98.8%(656/664),手工PCR-RSSO为88.3%(733/830).经x2检验,全自动半量PCR-RSSO与PCR-SSP的分型成功率无统计学差异,与手工PCR-RSSO有显著差异(P＜0.05).结论PCR-RSSO可识别HLA-Ⅰ,Ⅱ共706个等位基因,覆盖WHO命名委员会2000年公布的936个等位基因的75.43%;对706个HLA等位基因的分型均为中～高分辨率,有分辨纯合子等位基因的能力;易长期保存书面的实验原始资料,即杂交条;具有成本低、劳动强度低、省时和DNA消耗量少等优点.PCR-RSSO适合于造血干细胞移植和建立造血干细胞及脐带血干细胞库的组织配型.
关键词：HLA抗原聚合酶链反应等位基因序列分析DNA反向杂交序列特异性寡核苷酸
分类号：R392.11(医学免疫学)R394.2(医学遗传学)
资助基金：广东省广州市科技局科研项目(2000-Z-022-01)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 58-61 )
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