大鼠体外肝细胞集落的建立及生长调控研究
汤习锋1
周东耀2
徐智民3
周晓东4
1.第一军医大学南方医院实验诊断科,广东,广州,5105152.第一军医大学珠江医院实验诊断科,广东,广州,5102823.第一军医大学南方医院消化科,广东,广州,5105154.中山医科大学第二附属医院医学实验中心,广东广州,510120
摘要：目的研究建立体外培养肝细胞集落的关键条件,探讨肝细胞克隆生长的调控机制.方法采用原位预灌流和胶原酶循环灌流分离肝细胞,观察在化学限定培养条件下,肝细胞生长素(HPN)、二甲亚砜(DMSO)及尼克酰胺(NA)对肝细胞DNA合成、有丝分裂象、光镜形态和电镜超微结构的影响.结果肝细胞培养时间进程显示:10 mmo1/LNA显著协同HPN促进肝细胞3H-TdR掺入作用,在60和84 h出现2个DNA合成峰;2%DMSO抑制3H-TdR掺入,但在NA共同作用下,肝细胞在132 h表现为DNA合成峰.有丝分裂象显示:HPN+NA+DMSO培养72 h时肝细胞为正常二级分裂,168h后仍保持相当的有丝分裂活性.光镜下形态及电镜超微结构观察到培养28d的肝细胞克隆生长特征及增殖潜在性.结论NA及DMSO加入-移除方案可交叉控制HPN作用的肝细胞增殖,所构建的肝细胞克隆生长系统可用于人肝细胞代谢、诱变、细胞中毒及生物转化等研究,并为实施体外克隆肝细胞治疗肝衰竭及遗传性肝疾病提供实验依据.
关键词：肝细胞集落细胞分裂肝细胞生长因子二甲亚砜烟酰胺
分类号：R329.25(人体形态学)R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家科技攻关计划(967500166)四川省卫生厅项目(920039)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 106-109,113 )
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