限制性显示-聚合酶链反应扩增苏云金杆菌基因片段的克隆与分析
李侠1
马文丽1
庞义2
张宝1
姜立1
郑文岭3
1.第一军医大学分子生物学研究所,广东,广州,5105152.中山大学生命科学学院,广东,广州,5106323.广州军区广州总医院分子肿瘤学研究所,广东,广州,510010
摘要：目的运用限制性显示-PCR技术(RD-PCR)扩增苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)基因片段,并进行克隆、测序分析.方法设计特异性引物扩增长片段Bt基因,对扩增产物进行RD-PCR扩增,扩增后的产物克隆至pMD18-T载体并进行快速鉴定.提取阳性克隆质粒进行测序分析.结果运用RD-PCR技术,将长片断的基因(2 000-3 000 bp)分为多个短的片段,片段长度较为均一(200～600 bp).测序结果表明,所扩增的片段均属于特异扩增的Bt基因.结论运用RD-PCR技术可以将长片段基因进行片段化,使其适用于基因芯片的探针.
关键词：限制性显示-聚合酶链反应苏云金杆菌基因克隆
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(39880032)广州市科技攻关计划(99-Z-022-01)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 323-325 )
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