SARS冠状病毒多聚酶基因临床检测方法的建立
杨洁
王战会
陈金军
侯金林
1.第一军医大学南方医院感染内科,广东,广州,5105152.第一军医大学南方医院感染内科,广东,广州,5105153.第一军医大学南方医院感染内科,广东,广州,5105154.第一军医大学南方医院感染内科,广东,广州,510515
摘要：目的分析SARS冠状病毒广东株多聚酶基因片段的异质性,建立RT-PCR检测SARS冠状病毒的方法,为SARS的快速诊断提供依据.方法合成针对SARS冠状病毒多聚酶基因区段的特异性引物,从广东省SARS病人及疑似病人标本中提取RNA,经反转录和巢氏PCR扩增出相应大小的DNA片段.对这些片段克隆后进行DNA序列分析,并将序列与SARS冠状病毒和其他已知冠状病毒进行同源性分析.结果从多例SARS病人痰、咽拭子或血液标本中得到RT-PCR阳性片段,随机选取其中8例经克隆和DNA序列分析证实均为SARS冠状病毒序列(同源性100%),而所有阴性参照标本RT-PCR均为阴性.克隆片段BNI109与已知冠状病毒在核苷酸和氨基酸水平进行分析显示,该片段与牛冠病毒(bovine coronavirus,BCV)和鼠肝炎病毒(murine hepatitis virus,MHV)同源性最高,在氨基酸水平上同源性高达75%.结论SARS冠状病毒多聚酶基因片段BNI109的保守性极强,适合建立RT-PCR法检测SARS冠状病毒.
关键词：严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒RT-PCR
分类号：Q783.2(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30225042)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 424-427 )
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