人源性大肠癌抗原基因噬菌体表达文库的构建及鉴定
刘宇虎
张振书
钟东
武金宝
但汉雷
杨兴龙
杨晓强
陈学清
赖卓胜
肖冰
1.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,5105152.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,5105153.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,5105154.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,5105155.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,5105156.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,5105157.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,5105158.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,5105159.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,51051510.第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,510515
摘要：目的构建人源性大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库.方法从人大肠癌组织中提取总RNA,用RT-PCR合成cDNA第1链,用LD-PCR合成cDNA第2链,除去小于500p的小片段,与去磷酸化的λTriplEx2噬菌体左、右臂连接,体外包装,构建成cDNA噬菌体表达文库.转化E.coli XL1-B1ue感受态细胞,滴定文库的滴度,确定文库容量大小;用ITPG诱导和X-gal显色测定重组率;用Sfi Ⅰ酶切鉴定插入的cDNA片段大小.结果构建成含2.39×106pfu/ml重组噬菌体的人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库,重组率为97.5%,插入cDNA片段大小范围从600～4000bp,平均长约1400bp.结论成功构建高质量人源性大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库,适合于大批量筛选cDNA克隆的大肠癌相关抗原基因.
关键词：结肠直肠肿瘤噬菌体抗体细菌抗原基因cDNA文库
分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)R735.35(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30171053)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 538-541，545 )
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