应用两步氯化钙转化法高效制备双自杀基因重组腺病毒
郑权1
黄宗海1
汤福祥1
黄媛媛1
车小燕2
1.第一军医大学珠江医院普外科,广东,广州,5102822.第一军医大学珠江医院中心实验室,广东,广州,510282
摘要：目的构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动下的双自杀基因重组腺病毒.方法应用PCR扩增出CD和TK基因,经适当改造后插入pAdtrack CMV中构建成转移质粒pAdtrack CMV-CDTK,经酶切线性化后,转化用氯化钙制备的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒.最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒,滴度测定后,体外感染血管内皮细胞ECV304.结果PCR检测表明已成功构建了含CD、TK融合基因的重组腺病毒,为进一步开展肿瘤的双自杀基因治疗研究奠定了基础.结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短.
关键词：腺病毒双自杀基因治疗AdEasy系统氯化钙转化法
分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2001AA217171)广东省自然科学基金(013072)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 575-577 )
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