丙型肝炎病毒整个开放阅读框序列的克隆及各组分蛋白的表达
吴娴波
吴英松
张彦明
董文其
李明
1.第一军医大学热带医学研究所,广东,广州,5105152.第一军医大学热带医学研究所,广东,广州,5105153.第一军医大学热带医学研究所,广东,广州,5105154.第一军医大学热带医学研究所,广东,广州,5105155.第一军医大学热带医学研究所,广东,广州,510515
摘要:目的在痘苗系统中表达丙型肝炎病毒(HCV)各组分蛋白.方法将编码HCV大前体蛋白的开放阅读框(ORF)序列克隆至痘苗启动子后,构建重组质粒pVHCV.重组质粒转染BHK21细胞后,再用痘苗病毒vTF7-3株感染,培养48 h后收集细胞.Western blotting和免疫荧光技术鉴定HCV非结构蛋白NS3和NS5a的表达情况.结果Westernblotting结果表明,在细胞中检测到相对分子质量为70000(NS3)和58 000(Ns5a)的两条带;免疫荧光试验结果表明,无论采用抗NS3单抗还是抗NS5a单抗,大部分转染质粒细胞的细胞质中都具有较强的荧光反应.结论HCV非结构蛋白NS3和NS5a在BHK21细胞中得到表达.
关键词:丙型肝炎病毒开放阅读框痘苗病毒非结构蛋白克隆分子
分类号:R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2001AA215171)
论文发表日期:2003-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 581-583 )
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第一军医大学学报

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-4254
年,卷(期):2003,23(6)
所属栏目:论著·基础研究