正、反义hTERT基因真核表达载体的构建与鉴定
孙来保1
李成荣1
文剑明2
张萌2
1.深圳市儿童医院,广东,深圳,5180262.中山大学医学院病理教研室,广东,广州,510089
摘要：目的构建正、反义hTERT基因真核表达载体,为进一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗作准备.方法根据已发表在Genebank的hTERT cDNA序列,设计并合成了1对两端带特定限制性酶切位点引物,提取子宫颈癌HeLa细胞株总RNA,进行RT-PCR,并将扩增产物TA首先克隆至pGEMR-T载体,然后双酶切pGEM-T载体回收目的片段再克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(±)中,并对重组体进行酶切鉴定和测序分析.结果 PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实构建的正、反义hTERT基因真核表达载体克隆成功,插入片段测序结果与Genebank的hTERTcDNA的部分序列完全一致.结论成功地构建了正、反义hTERT基因真核表达载体,为下一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗打下了实验基础.
关键词：端粒酶hTERT基因基因治疗载体基因克隆
分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)
资助基金：广东省深圳市卫生科研项目(199805021)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 899-902 )
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