pcDNA3.1+-HIF-1α载体的构建和初步表达鉴定
傅锐斌1
吴平生1
戴铁英1
赖文岩1
邱建2
1.第一军医大学南方医院心内科,广东,广州,5105152.广州军区广州总医院心内科,广东,广州,510010
摘要：目的克隆和构建带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α.方法以大肠癌细胞株HT29的总RNA为模板,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),获得HIF-1α的cDNA,克隆入T载体,测序证实后克隆入真核表达载体pcDNA3.1+,酶切鉴定重组子.将构建好的pcDNA3.1+-HIF-1α用脂质体法转入HEK293细胞,RT-PCR鉴定重组质粒的表达.结果扩增出HIF-1α cDNA全长,测序结果与Genbank记载完全一致,成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1+;建立了稳定的细胞株HEK293/PcDNA3.1+-HIF-1α.结论成功克隆和构建带人HIF-1α基因真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α,并证明其能在真核细胞内表达.
关键词：低氧诱导因子逆转录-聚合酶链反应克隆分子真核表达载体质粒转染
分类号：R392.12(医学免疫学)R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(39870812)广东省自然科学基金(980235)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1134-1136 )
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