中国人Brugada综合征SCN5A基因突变K317N的定点诱变及其载体构建
易绍东
孟素荣
崔英凯
陈哲明
彭健
1.第一军医大学南方医院心内科,广东,广州,5105152.第一军医大学南方医院心内科,广东,广州,5105153.第一军医大学南方医院心内科,广东,广州,5105154.第一军医大学南方医院心内科,广东,广州,5105155.第一军医大学南方医院心内科,广东,广州,510515
摘要：目的对我们发现的中国人Brugada综合征新的SCN5A基因突变K317N进行体外定点诱变研究,并构建携带有基因突变K317N的pRc/CMV-hH1的表达载体.方法采用PCR定点突变技术,根据突变位置附近的两个单一限制性内切酶位点Age I/Sse 8387I设计一对定点诱变引物,将突变位点设计在引物上,通过PCR扩增,使扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pRc/CMV-hH1载体中.结果DNA测序表明,在预期位点巳经发生突变,SCN5A基因在第317密码子由赖氨酸(K)突变为天冬氨酸(N),成功实现定点诱变.结论PCR技术诱导定点突变,准确、高效.pRc/CMV-hH1(K317N)的成功构建,为进一步进行该突变的结构与功能研究奠定了基础.
关键词：聚合酶链反应定点诱变SCN5ApRc/CMV-hH1Brugada syndrome
分类号：R541.7(心脏、血管（循环系）疾病)Q782(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30278368)广东省自然科学基金(20042)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1139-1142 )
英文信息