脑源性神经营养因子受体trkB基因扩增和真核表达载体的构建
黄涛1
徐如祥1
武雷2
姜晓丹1
邱晓忠2
秦建强2
余磊2
许忠1
1.第一军医大学珠江医院神经外科,广东,广州,5102822.第一军医大学临床解剖学研究所,广东,广州,510515
摘要：目的构建大鼠脑源性神经营养因子受体trkB基因真核表达载体.方法根据trkB基因已知序列,设计合成一对引物,上、下游引物分别引入EcoR Ⅰ及BamH Ⅰ酶切位点,用反转录PCR(RT-PCR)方法从大鼠脑组织总RNA中扩增编码trkB的基因片断,插人克隆载体pMD 18-T,构建pMD 18-trkB载体.经EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切出trkB基因片断,再克隆至载体pEGFP-C2中构建pEGFP-C2-trkB真核表达载体.结果trkB基因RT-PCR扩增产物大小约1 461 bp,真核表达载体经酶切鉴定表明为正确重组子,基因测序结果与已知序列基本吻合.结论成功扩增出完整trkB基因,构建了真核表达载体pEGFP-C2-trkB.
关键词：脑源性神经营养因子基因表达重组遗传分子克隆
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：广东省科技厅科技项目(2003A3020304)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1283-1285,1289 )
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