人晚期糖基化终产物受体胞质内段融合蛋白表达载体的构建与表达
赵善超1
刘靖华2
李志杰2
秦清和2
邓鹏2
侯凡凡3
姜勇2
1.第一军医大学,全军休克微循环重点实验室,广东,广州,510515;第一军医大学,南方医院肾内科,广东,广州,5105152.第一军医大学,全军休克微循环重点实验室,广东,广州,5105153.第一军医大学,南方医院肾内科,广东,广州,510515
摘要：目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白.方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中.重组质粒经PCR、酶切、序列鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21,以异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导产生hRAGE胞质内段的GST融合蛋白.结果PCR、酶切和测序结果表明所克隆的GST/hRAGE-C原核表达载体完全正确,继而表达、纯化获得了相对分子质量约35 000的融合蛋白(符合预期大小).结论将hRAGE胞质内段构建于含有GST标记的载体上并获得融合蛋白的高效表达.
关键词：晚期糖基化终产物受体载体蛋白质类/化学合成序列分析融合蛋白质类蛋白纯化
分类号：Q512(蛋白质)Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30270622)国家自然科学基金(30330300)广东省自然科学基金(10717)国家自然科学基金(39925014)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1314-1316 )
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