人血小板衍生生长因子B链基因酵母表达载体的构建
杨春露1
陈建庭1
邓凡2
唐焕章1
谭小云1
罗深秋2
1.第一军医大学南方医院脊柱骨病科,广东,广州,5105152.第一军医大学细胞生物学实验室,广东,广州,510515
摘要：目的构建带信号肽和不带信号肽的人血小板衍生生长因子B(PDGF-B)链基因酵母表达载体,探讨该基因在酵母中的表达效率和活性.方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从人血管内皮细胞总RNA中扩增出PDGF-B的cDNA,克隆入pGEM-T载体,进行序列测定.进而克隆至酵母表达质粒pMETB和pMETαA并进行重组子双酶切鉴定.结果扩增获得了含信号肽(578 bp)和不含信号肽(340 bp)的编码PDGF-B链基因;构建了PDGF-B的酵母表达载体pMETB-PDGFB1,pMETαA-PDGFB2.测序结果显示,重组载体中目的基因序列与GENE BANK公布的序列一致.结论人血小板衍生生长因子B链基因酵母表达载体构建成功,为进一步在酵母中的高效表达奠定基础.
关键词：血小板源生长因子遗传载体/化学合成RT-PCR酵母
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30271321)广州市科技攻关计划(2001-Z-035-1-3)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 273-276 )
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