应用抑制消减杂交克隆支气管哮喘病人嗜酸细胞差异表达基因
徐劲松
蔡绍曦
邹飞
佟万成
赵海金
1.第一军医大学南方医院呼吸科,广东,广州,5105152.第一军医大学南方医院呼吸科,广东,广州,5105153.第一军医大学南方医院呼吸科,广东,广州,5105154.第一军医大学南方医院呼吸科,广东,广州,5105155.第一军医大学南方医院呼吸科,广东,广州,510515
摘要：目的探讨嗜酸细胞在支气管哮喘发病中的分子机制.方法提取1名哮喘发作病人嗜酸细胞总RNA为实验子,治疗后作为对照的嗜酸细胞的RNA为驱动子.检测子、驱动子的总RNA由SMART cDNA合成方法合成双链cDNA,进而由抑制消减杂交方法获得消减杂交产物.消减杂交产物克隆到T载体建立消减文库,对部分克隆进行杂交筛选及序列比对.结果消减杂交文库挑取400个克隆进行PCR扩增,阳性率约为80%.部分阳性克隆经2轮杂交筛选及序列对比后获得6个差异片段,涉及与编码炎症介质、细胞信号传导、能量代谢和细胞凋亡相关的基因.结论抑制消减杂交技术有效地克隆了支气管哮喘发作期和缓解期嗜酸细胞差异表达的基因,为阐明嗜酸细胞在支气管哮喘发病中的分子机制奠定了良好的基础,并为临床防治支气管哮喘、寻找新的药物和方法提供了依据.
关键词：支气管哮喘嗜酸细胞抑制消减杂交差异表达基因
分类号：R562.2(呼吸系及胸部疾病)
资助基金：国家自然科学基金(30270593)广东省自然科学基金(A001031)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 509-512 )
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