DNA芯片技术筛选K562肿瘤细胞特异性基因
彭桂福1
马文丽1
宋艳斌1
彭翼飞1
石嵘1
毛向明1
郑文岭2
1.第一军医大学分子生物研究所,广东,广州,5105152.广州军区广州总医院分子肿瘤研究所,广东,广州,510010
摘要:目的应用DNA芯片技术筛选人白血病K562细胞中的肿瘤特异性基因.方法提取正常人白细胞和K562细胞基因组DNA,并用限制性内切酶Sau3AI酶切.其中K562细胞基因组酶切产物经DNA聚合酶Ⅰ补平加A后克隆到T-载体,挑选阳性克隆,用PCR扩增,以纯化的PCR产物做探针,制备K562细胞基因组DNA芯片.正常人白细胞基因组酶切产物加上人工通用接头,用限制性标记技术标记上荧光标记物Cy3,与制备的K562细胞基因组DNA芯片杂交.结果芯片杂交结果经扫描分析,发现42个K562细胞肿瘤特异性基因,进一步用序列分析证实,其中有1个为BCR(breakpoint cluster gene)基因.结论我们自制的K562细胞基因组DNA芯片可以成功地用于筛选肿瘤特异性基因,为更好地从基因组水平研究肿瘤发生的分子机制提供了新的技术途径.
关键词:基因芯片白细胞正常人K562细胞差异基因
分类号:R378.61(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
资助基金:国家自然科学基金(39880032)
论文发表日期:2004-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 525-528 )
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