人ARPC2基因的克隆与表达
龚小卫
彭毅
刘靖华
李志杰
邓鹏
秦清和
姜勇
1.第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东,广州,5105152.第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东,广州,5105153.第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东,广州,5105154.第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东,广州,5105155.第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东,广州,5105156.第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东,广州,5105157.第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东,广州,510515
摘要：目的构建人His-ARPC2融合蛋白表达载体,并在原核细胞中进行表达与纯化,以研究其功能及鉴定与其相互作用的蛋白.方法采用PCR方法从人肝cDNA文库扩增ARPC2基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pET-14b载体中.对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定.转化BL21(DE3)大肠杆菌株,用异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达,并利用Ni-NTA亲和层析纯化该融合蛋白.结果所构建的人ARPC2的His融合蛋白表达载体是正确的,该载体可在大肠杆菌内高效表达,用Ni-NTA纯化获得了相对分子质量约36000的融合蛋白.结论成功构建了人His-ARPC2融合蛋白表达载体,并在原核细胞中获得了高效表达和纯化,为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料.
关键词：ARPC2载体构建基因表达蛋白纯化
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(39925014)国家自然科学基金(30030060)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 628-630,635 )
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