应用抑制消减杂交技术克隆人大肠癌转移相关新基因
梁莉
丁彦青
李欣
杨玉芳
肖军
张进华
赵培冉
1.第一军医大学病理学教研室,广东,广州,5105152.第一军医大学病理学教研室,广东,广州,5105153.第一军医大学病理学教研室,广东,广州,5105154.第一军医大学病理学教研室,广东,广州,5105155.第一军医大学病理学教研室,广东,广州,5105156.第一军医大学病理学教研室,广东,广州,5105157.第一军医大学病理学教研室,广东,广州,510515
摘要：目的克隆新的大肠癌转移相关基因,为进一步阐述大肠癌转移的分子机制提供线索.方法利用抑制消减杂交技术,以1对来自同一亲本、转移能力不同的大肠癌细胞株SW620和SW480为研究对象,构建2种大肠癌转移促进基因和转移抑制基因的cDNA消减文库.随机挑取文库克隆进行差异筛选,对所得的差异片段进行测序和同源性分析,利用NorthemBlot对新基因的表达情况进行验证.结果两种消减文库分别含有235和232个白色克隆,90%以上的白色克隆含有插入片段.随机挑取约200个阳性克隆进行差异筛选,共获得29个差异片段.测序及同源分析发现15个为未知基因,GenBank登陆号为CD485499-CD485513.其中与5号染色体序列同源的基因有6个.结论抑制消减杂交技术是筛选、克隆大肠癌转移相关新基因的有效手段;5号染色体上可能存在多个与大肠癌转移相关的新基因位点:筛选到的新基因片段为进一步克隆其全长、研究基因功能提供了实验基础.
关键词：基因大肠癌肿瘤转移抑制消减杂交差异表达
分类号：R735.3(消化系肿瘤)
资助基金：国家重点基础研究发展计划(973计划)(2001C13510208)国家自然科学基金(30170423)军队医药项目(01MA128)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 742-745 )
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