人血浆中MBL-MASP复合物的纯化与分离
陈月
张丽芸
陈政良
1.南方医科大学免疫学教研室,广东,广州,5105152.南方医科大学免疫学教研室,广东,广州,5105153.南方医科大学免疫学教研室,广东,广州,510515
摘要：目的从人血浆中分离纯化甘露聚糖结合凝集素(MBL)和MBL相关丝氨酸蛋白酶(MASP).方法用非活化Sepharose 4B两步亲和层析纯化MBL-MASP复合物,再以Sephacryl S-300柱凝胶过滤将MBL和MASP分离.在纯化MBL-MASP复合物的整个过程中,除凝胶过滤缓冲液外,均加入丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲磺酰氟(PMSF)和金属蛋白酶抑制剂1,10-邻二氮杂菲(1,10-phenanthroline),并控制温度在4℃.结果获得高度纯化的MBL和酶原形式的MASP.SDS-PAGE和Western blotting表明所纯化的MBL相对分子质量为28000和32000肽链构成的功能性多聚体;配体结合测定和酵母菌凝集试验证实所纯化的MBL具有生物学活性.结论建立了一种比较简便的同时分离纯化MBL和MASP酶原的方法.
关键词：甘露聚糖结合凝集素甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶亲和层析凝胶过滤
分类号：R392-33(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30371310)广东省自然科学基金(015003)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1373-1377 )
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