SARS病毒S蛋白的原核表达与DNA疫苗的构建
李建娜1
向开军2
周荣3
黄春华2
丁勇强2
曾其毅4
钟秋平1
1.华南热带农业大学,海南,儋州,5717372.广州华银基因科技有限公司,广东,广州,5101503.广州华银基因科技有限公司,广东,广州,510150;广州市儿童医院,广东,广州,5101204.广州市儿童医院,广东,广州,510120
摘要：目的探讨SARS冠状病毒的刺突(spike,S)蛋白的免疫学特性,以及S蛋白作为SARS-CoV病毒疫苗组分的可行性.方法将S蛋白基因分段克隆入原核表达载体pET-15b,并在大肠杆菌中表达,经过亲和层析得到纯化的重组蛋白rSa和rSb;将全长S基因克隆入真核分泌表达载体pSecTagB,得到重组DNA疫苗pSecS,免疫小鼠,得到SAS-CoVS蛋白抗血清.然后用纯化的重组蛋白rSa和rSb建立的SARS-CoV S抗体ELISA检测技术研究所构建的S-DNA疫苗的免疫效果.结果分段的重组蛋白rSa和rSb在大肠杆菌中均以可溶性形式得到高效表达,并能与SARS确诊病人血清以及pSecS免疫鼠血清发生特异性抗原抗体反应,原核表达的重组分段S蛋白具有SARS-CoV S蛋白相似的抗原性.结论原核表达的两段重组S蛋白有可能作为抗原组分用于临床SARS-CoV检测中;所构建的SARS-CoV的S基因核酸疫苗能在小鼠体内产生特异性抗体,这为进一步SARS DNA疫苗的研制提供一定的借鉴作用.
关键词：SARS冠状病毒S蛋白DNA疫苗
分类号：Q7(分子生物学)
资助基金：广州市科技攻关计划(2003Z1-10011)国家科技攻关计划(20032104056)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 33-36 )
英文信息