人GFP-AWP1融合基因载体的构建及其在293细胞中的表达
曹永宽1
莫永炎2
田伏洲3
刘亚伟2
邓鹏2
秦清和2
姜勇2
1.南方医科大学病理生理学教研室和全军休克,微循环重点实验室,广东,广州,510515;成都军区总医院全军普外中心,四川,成都,6100832.南方医科大学病理生理学教研室和全军休克,微循环重点实验室,广东,广州,5105153.成都军区总医院全军普外中心,四川,成都,610083
摘要：目的克隆、构建绿色荧光蛋白(GFP)-AWP1(associated with protein kinase C related kinase 1,AWP1)表达载体,观察AWP1在293细胞中表达和定位.方法采用逆转录PCR(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞中扩增AWP1 cDNA编码区,并将其重组于GFP表达载体pEGFP-C2中.经酶切、序列鉴定分析后,将该重组质粒通过DOTAP脂质体介导,转染293细胞.荧光显微镜观察AWP1在细胞内的表达和分布.结果GFP-AWP1融合基因表达载体经酶切鉴定和测序分析确认构建成功,并在293细胞中获得了高效表达.荧光显微镜下,在不携带外源基因的空载体pEGFP-C2转染的对照组293细胞,绿色荧光均匀分布于整个细胞中;在重组质粒pEGFP-C2/AWP1转染的293细胞,绿色荧光弥散分布于细胞质内.结论成功构建GFP-AWP1融合基因表达载体并表达于293细胞胞质中.
关键词：AWP1绿色荧光蛋白293细胞
分类号：R329.4(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(39925014)国家自然科学基金(39830400)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2002CB513000)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 174-176,180 )
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