体外诱导Balb/C小鼠ES细胞定向分化为胰岛样细胞团的形态观察
刘美莉1
熊轶1
蔡继业1
潘运龙1
孟凡义2
李凌松3
1.暨南大学生命科学院化学系,广东,广州,5106322.南方医科大学南方医院血液科,广东,广州,5105153.北京大学干细胞研究中心,北京,100083
摘要:目的体外诱导Balb/C小鼠胚胎干细胞定向分化为胰岛样细胞团,观察细胞表面形态学的变化.方法选用Balb/C小鼠ES细胞,经过拟胚体(EB)发育分化4 d后开始定向诱导培养,不同时间段分别向细胞培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子-1和尼克酰胺和N等细胞生长因子,使ES细胞定向分化为胰岛样细胞团.免疫细胞化学检测表达胰岛素和胰高血糖素的阳性细胞.原子力显微镜(AFM)原位扫描阳性细胞团.结果EB细胞生长为大小不一、境界清楚的细胞团,细胞团内细胞排列紧密.胰岛B细胞数量多,主要分布在细胞团的中央,边缘少,染色较淡.而表达胰高血糖素的A细胞主要分布在细胞团的边缘,数量相对较少.AFM扫描可见表达胰岛素的阳性细胞团,其表面有很多类似神经纤维束,接成网络状.在细胞质中,还有很多类圆形的颗粒物质,其大小几乎一致,粒径都处于0.5~1.0μm间.结论诱导分化得到的细胞团不仅有形态和功能上的成熟,而且还具备良好的组织结构,为细胞的移植疗法提供了可靠的凭据.
关键词:胚胎干细胞定向分化胰岛样细胞团原子力显微镜可视化
分类号:Q24(细胞形态学)
资助基金:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2001CB510101)国家自然科学基金(30230350,60278014)
论文发表日期:2005-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 377-379,402 )
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