人内皮抑素基因的克隆、表达、纯化及活性测定
杨芳1
何援利1
姜孝玉2
刘芸2
彭冬先1
宗利丽1
1.南方医科大学珠江医院妇产科,广东,广州,5102822.中山大学生命科学院医药分子生物学实验室,广东,广州,510275
摘要：目的获得有生物学活性的人内皮抑素蛋白.方法用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到人内皮抑素编码区基因,连接PGEM-T载体,测序确认,定向克隆入pBV220表达载体,转化大肠杆菌DH5α进行表达、纯化及活性测定.结果经测序分析证实,所获得的552bp基因片段序列属于人内皮抑素基因,构建表达载体在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,并具有生物学活性.结论人内皮抑素基因在大肠杆菌中获得非融合表达,表达蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的增殖,为应用内皮抑素进行抗血管生成治疗奠定了基础.
关键词：人内皮抑素基因克隆表达纯化抗血管生成作用
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)R392.11(医学免疫学)
资助基金：广东省科技厅科技项目(2003B30502)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 416-418 )
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