具有免疫反应性的弓形虫多表位抗原在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定
杨培梁1
陈晓光2
王元占1
李华2
周晓红2
吴焜2
言慧2
1.南方医科大学南方医院实验动物研究中心,广东,广州,5105152.南方医科大学寄生虫学教研室,广东,广州,510515
摘要：目的获得弓形虫多表位基因在原核系统中可溶性表达产物,为弓形虫病重组抗原试剂盒的制备及疫苗的研究奠定基础.方法以PCR法扩增弓形虫多表位基因,使其两端带有与载体pET32a相匹配的酶切位点,插入载体pET32a,酶切并测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行诱导,SDS-PAGE分析和鉴定该基因的表达水平、表达产物的可溶性及其相对分子质量,Western-blot分析表达产物的免疫反应性.结果该基因在原核表达系统中经诱导,得到了Mr31000的可溶性融合表达产物.经Ni-NTA纯化,纯度可达90%以上.免疫印迹实验表明该产物能够被弓形虫B36感染的小鼠血清和弓形虫RH感染的兔血清特异识别.结论弓形虫多表位基因在原核中的可溶性表达产物在弓形虫病诊断及疫苗研究中有潜在的应用价值.
关键词：弓形虫多表位大肠杆菌蛋白表达免疫反应性
分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)R382.5(医学寄生虫学)
资助基金：广东省自然科学基金(20020041)广州市科技攻关计划(2002Z-T24011)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 528-530,544 )
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