脱氧核酶对端粒酶RNA的切割和乳腺癌细胞凋亡相关基因表达的作用
赵家明1
李明意2
杨展1
李震1
张毅1
1.广东医学院附属医院,中心实验室,广东,湛江,5240012.广东医学院附属医院,普通外科,广东,湛江,524001
摘要：目的探讨脱氧核酶对端粒酶RNA组分(hTR)的切割作用及对人乳腺癌细胞凋亡相关基因bcl-2和bax表达的影响.方法针对hTR基因的核苷酸序列,合成"10～23"型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割hTR RNA;转染乳腺细胞后,用RT-PCR扩增hTR基因片段,用PCR-ELISA法测定端粒酶活性,用RT-PCR和荧光免疫测定凋亡相关基因bcl-2和bax的表达.结果未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3′末段添加倒位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割hTRRNA;在转染乳腺癌细胞后,DzTi比DzT对hTRRNA表现出更强的切割作用,DzTi能够显著地降低乳腺癌细胞端粒酶活性(P＜0.05),但对乳腺癌细胞的生长和细胞凋亡相关基因bcl-2和bax基因没有明显的影响(P＞0.05).DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT′和DzTi′在胞外和胞内均不表现对hTR RNA的切割作用.结论人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割端粒酶hTR RNA,并降低乳腺癌细胞的端粒酶活性.作为一种新发现的催化性核酸,脱氧核酶在肿瘤的基因治疗领域中可能具有极其重要的应用价值.
关键词：催化性DNA端粒酶乳腺肿瘤bcl-2bax
分类号：R737.9(泌尿生殖器肿瘤)Q523(核酸)
资助基金：国家自然科学基金(B1997119)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 638-642 )
英文信息