小鼠肝脏磷酸化蛋白质组的二维液相色谱分离
黎永明
陈腾祥
杨丽萍
刘亚伟
姜勇
1.南方医科大学病理生理学教研室,广东,广州,5105152.南方医科大学病理生理学教研室,广东,广州,5105153.南方医科大学病理生理学教研室,广东,广州,5105154.南方医科大学病理生理学教研室,广东,广州,5105155.南方医科大学病理生理学教研室,广东,广州,510515
摘要：目的利用二维液相色谱法分离小鼠肝脏磷酸化蛋白质组.方法取正常小鼠肝脏,裂解肝脏后利用金属磷酸盐亲和层析树脂提取磷酸化蛋白.将磷酸化蛋白用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,再将一维收集的pH值在8.5至4.0之间的组分分别进行二维无孔硅胶反相高效液相色谱分离.最后利用ProteoVue软件将二维UV图转换成胶图进行分析.结果成功提取了小鼠肝脏磷酸化蛋白,并在浓缩除盐后通过二维液相色谱分离成功建立小鼠肝脏磷酸化蛋白质组pI/UV图谱.其中,一维色谱聚焦分离pH值在8.5至4.0之间共收集16个组分,每个组分的二维UV图转换成pI/UV胶图.结论磷酸化蛋白纯化技术与二维液相色谱技术的结合是研究磷酸化蛋白质组的有效方法,为下一步鉴定和研究磷酸化蛋白的功能打下坚实的基础.
关键词：磷酸化蛋白质组色谱聚焦反相高效液相色谱二维液相色谱分离
分类号：Q51(蛋白质)Q503(一般性问题)
资助基金：国家自然科学基金(39925014)国家自然科学基金(30030060)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2002CB513000)国家高技术研究发展计划（863计划）(2001AA234061)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1152-1154,1157 )
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