干扰素诱导的跨膜蛋白-1基因的扩增、克隆及蛋白表达
刘宇虎1
钟东2
柳娟1
张振书2
陈村龙2
武金宝2
肖冰2
郭文英1
1.东莞市人民医院消化科,广东,东莞,5230182.南方医科大学南方医院消化病研究所,广东,广州,510515
摘要：目的研究干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-inducible transmembrane protein-1,IFITMP-1)基因的扩增、克隆及蛋白表达.方法以含IFITMP-1基因的cDNA为模板,用Pfu酶做PCR扩增,用EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切,将目的基因克隆到pUCm-T质粒测序.进一步克隆到pET-Trx蛋白表达载体质粒,优化蛋白表达条件.结果含有IFITMP-1基因的PCR产物约1000 bp.重组pUCm-T质粒经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切,有相应大小的cDNA片段插入,测序结果显示其序列正确,证实目的基因的扩增、克隆成功,并成功克隆进pET-Trx蛋白表达载体,经IPTG诱导,在BL21(DE3)plysS中有融合蛋白表达.结论成功扩增克隆IFITMP-1基因,并成功表达该基因编码的蛋白,为进一步研究IFITMP-1基因在大肠癌中的作用奠定了基础.
关键词：干扰素跨膜蛋白-1基因大肠肿瘤PCR克隆蛋白表达
分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)R735.35(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30171053)广东省医药卫生科研项目(B2005089)广东省东莞市科技计划(B200501)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1221-1224 )
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