乳链菌表达系统的构建及其鉴定
杨晓强1
彭春秀2
姜泊1
邢锐1
张绍荣1
陈学清1
1.南方医科大学南方医院消化病研究所,广东,广州,5105152.海王英特龙生物技术股份有限公司,广东,深圳,518052
摘要：目的构建可以在乳链菌表达外源性基因的系统.方法采用基因拼接方法拼装含有P59启动子、USP45蛋白信号肽及多克隆位点的基因序列,并将其连入质粒pBluescript Ⅱ SK(+)以形成重组质粒pBS-PU,PCR扩增USP45终止子并连接至质粒pBS-PU构建可将外源性基因分泌表达于菌体外的质粒pNBC1000,PCR扩增M6基因随后连接至pNBC1000构建可将外源性基因分泌表达于菌体外及锚定表达于细胞壁的质粒pNBC2000.通过将增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因连接至质粒pNBC2000,激光共聚焦显微镜下观察含有pNBC2000-EGFP质粒及对照质粒的细菌,验证EGFP定位表达情况.结果所构建的表达系统可以表达EGFP基因.结论通过基因拼接方法成功构建了乳链菌表达系统,其可将外源性基因分泌表达于菌体外.
关键词：基因拼接乳链菌外源性基因表达系统
分类号：Q939.11(微生物分类学（系统微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30570839)广东省自然科学基金(05004735)广东省广州市科技局科研项目(2002Z3-E4101)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1232-1235,1239 )
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