HER2基因的克隆及其在MCF-7细胞中的表达
李荣
郑航
罗荣城
1.南方医科大学南方医院肿瘤科,广东,广州,5105152.南方医科大学南方医院肿瘤科,广东,广州,5105153.南方医科大学南方医院肿瘤科,广东,广州,510515
摘要：目的克隆人表皮生长因子受体(HER2)基因,建立共表达HER2基因和雌激素受体(ER)基因的MCF-7细胞模型.方法从高表达HER2的人乳腺癌细胞株SKBR-3中,用RT-PCR技术克隆HER2基因全长cDNA,将其插入载体pcDNA3.1中构建重组真核表达载体pcDNA3.1-HER2.测序鉴定后,利用阳离子脂质体介导将其转染ER阳性的乳腺癌MCF-7细胞,经G418筛选阳性克隆.用免疫细胞化学、流式细胞术及Western blotting等方法检测HER2基因在MCF-7细胞中的稳定表达情况.结果DNA测序证明,获得的HER2基因序列与GenBank中报道序列完全一致.将其转染MCF-7细胞,经流式细胞术、Western blotting及免疫细胞化学等方法检测证实,转染细胞内有HER2基因高表达.结论成功克隆HER2基因并获得共表达HER2基因和ER基因的MCF-7细胞株.
关键词：人表皮生长因子受体雌激素受体HER2基因表达克隆转染乳腺肿瘤MCF-7细胞
分类号：R394.2(医学遗传学)R737.9(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：广东省自然科学基金(037050)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1264-1267 )
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